podle pravidel pro odběr krevních vzorků skotu
Pro získání spolehlivých výsledků jsou důležité podmínky pro odběr krve a její uchování před zahájením laboratorních vyšetření. Tyto výsledky do značné míry závisí na technice odběru krve a použitých nástrojích.
Během venepunkce se tkáň obklopující žílu a stěna žíly propíchnou v jednom kroku.
Výsledky laboratorních testů mohou být ovlivněny faktory souvisejícími s individuálními charakteristikami a fyziologickým stavem těla zvířete, jako jsou: věk; emoční stav a duševní stres; klimatické a meteorologické podmínky atd.
Pokud je to možné, krev by měla být odebrána ráno, před krmením zvířat.
Zvířata se doporučuje odčervovat 2 týdny před odběrem krve.
Aby se předešlo falešně pozitivním výsledkům výzkumu, doporučuje se odběr krve nejpozději tři týdny před otelením a ne dříve než 3 týdny po otelení.
Na přesnost a správnost výsledků má vliv i technika odběru krve, použité nástroje (jehly, injekční stříkačky apod.), zkumavky, ve kterých se krev odebírá, následně skladuje a přepravuje, a také podmínky pro skladování a přípravu vzorku k analýze.
Tradiční a v současnosti široce používané metody odběru krve pomocí jehly a/nebo injekční stříkačky jsou hlavním zdrojem laboratorních chyb vedoucích ke špatné kvalitě výsledků testů. Tyto metody navíc nelze standardizovat a nezajišťují bezpečnost personálu odebírajícího krev.
Při odběru vzorků žilní krve gravitací pomocí jehly a běžných zkumavek je vysoká pravděpodobnost, že se krev zvířete dostane do rukou veterinárního specialisty. V tomto případě se ruce veterináře mohou stát zdrojem přenosu a šíření patogenů krví přenosných infekcí na další zvíře kontaminací injekční rány krví. Sám veterinář se může nakazit od zdroje nákazy.
Rovněž je třeba se vyhnout použití lékařské stříkačky s jehlou pro odběr krve z důvodu nedostatečné bezpečnosti pro veterinární personál a nemožnosti vyhnout se hemolýze krve při převádění vzorku pod tlakem do zkumavky.
Odběr krve pomocí vakuových systémů:
Pro odběr vzorků žilní krve je nejvýhodnější použít vakuové systémy. Tato metoda má řadu výhod, hlavní je, že krev jde přímo do uzavřené zkumavky, což zabraňuje jakémukoli kontaktu veterinárního personálu s krví zvířete.
Hovoříme nejen o zjednodušení postupu odběru krve, což je samo o sobě důležité, ale také o výrazném snížení procenta preanalytických chyb, zvýšení bezpečnosti postupu, snížení rizika infekce hospodářských zvířat, udržení úrovně dojivost po zákroku a absence komplikací u zvířat po odběru krve.
Systém obsahující vakuum je uzavřený dvousložkový systém – nádoba vakuové stříkačky a speciální jehla. K uvolnění séra nebo kombinace krve s antikoagulantem dochází ve stejném objemu stříkačky, do kterého se krev odebírá, to znamená, že po odběru krve je samotná stříkačka transportní zkumavka s antikoagulantem nebo sérem.
Pod vlivem vakua je krev nasávána jehlou vakuového systému přímo ze žíly do zkumavky a je okamžitě smíchána s chemickým činidlem. Pečlivě dávkovaný objem vakua zajišťuje přesný poměr krev/činidlo ve zkumavce.
Na základě schopností systémů obsahujících vakuum byla vyvinuta nová metoda odběru krve skotu z ocasní žíly:
- Krev se odebírá z v.c occygea (ocasní žíla).
- Zvíře není omezeno na odběr krve.
- Ocas zvířete se vezme rukou ve střední třetině a pomalu se zvedne.
- Místo odběru krve, oblast 2-5 ocasních obratlů, se dezinfikuje alkoholem nebo 5% roztokem jódu.
- Krev se odebírá ze střední třetiny těla 2-5 ocasních obratlů, které se nacházejí na linii probíhající podél ocasu a rozdělují jej na 2 symetrické části.
- Jehla se zavádí pod úhlem 90°, dokud se nezastaví do hloubky 5-10 mm.
Výhody odběru krve pomocí bezpečných systémů z ocasní žíly:
1. Zkrácení doby odběru krve veterinárním lékařem; (až 200 zvířat za 2 hodiny)
2. Nedostatek fixace zvířete;
3. Vyhýbání se kontaktu veterinárního lékaře s krví ve všech fázích odběru a přepravy krve;
4. Prevence šíření infekcí krví a znečištění (kontaminace) objektů životního prostředí; (obzvlášť relevantní pro bovinní leukémii)
5. Minimalizace komplikací a stresu u zvířat;
6. Nedostatek snížení produkce mléka v důsledku stresu a komplikací
7. Možnost získání sterilní krve.
Odběr krve pomocí krevních jehel a hadiček:
Jehly na odběr krve by měly mít krátké zkosení a dostatečně velký průměr, aby neporanily protější stěnu žíly a nepoškodily červené krvinky. Před odběrem krve je třeba jehly sterilizovat varem. Srst v místě odběru krve se pečlivě ostříhá, kůže se dezinfikuje dezinfekčním roztokem.
U skotu se krev odebírá z krční žíly v horní třetině krku.
Krev pro získání séra by měla být odebrána pokud možno ráno, před krmením zvířat. Pro sérologické vyšetření se skotu odebere 7-10 ml krve.
Při odběru krve z jugulární žíly se jehla zavede na hranici přechodu horní třetiny krku do střední třetiny. Aby došlo k dostatečnému naplnění žíly a snížení její pohyblivosti, je žíla uprostřed krku stlačena gumičkou nebo prstem. Při napichování žíly je nutné držet jehlu v ruce tak, aby se její směr shodoval s linií žíly a aby zkosení jehly směřovalo nahoru, k hlavě. Jehla se zavádí pod ostrým úhlem – 20–30°. Když jehla vstoupí do žíly, krev vytéká.
Krev by měla stékat po stěně zkumavky, aby nedošlo k destrukci červených krvinek, a v případě potřeby ihned smíchat s dostatečným množstvím antikoagulantu.
Před vytažením jehly ze žíly se odstraní gumička, prstem se žíla nad místem vpichu sevře, jehla se vyjme a místo vpichu se na nějakou dobu stlačí tamponem, aby se zabránilo vzniku hematomu . Nakonec se místo venepunkce dezinfikuje dezinfekčním roztokem.
Nevýhody zavedené metody odběru krve z jugulární žíly flebotomickou jehlou:
- Stříkání krve; (krev se dostane na ruce, krmítka a další předměty prostředí).
- Vysoké riziko šíření infekcí, které jsou nebezpečné nejen pro zvířata, ale i pro lidi; (tuberkulóza, brucelóza, bovinní leukémie).
- Potřeba omezit zvíře.
- Stres u zvířete vedoucí ke ztrátě mléka (více než 5 %).
- Komplikace po odběru krve; (hematomy, abscesy).
- Odebraná krev je nesterilní (tj. kontaminovaná).
Skladování vzorků krve a séra:
Plná krev, plazma a sérum pro krátkodobé skladování jsou umístěny v chladničce (+2. +4°C), dlouhodobé uchovávání séra vyžaduje teplotu – 20°C.
Krevní sérum se získává sedimentační metodou. Pro srážení krve a usazování séra se zkumavky s krví uchovávají 30-60 minut při 20-30°C nebo 37-38°C, krevní sraženina se oddělí od stěn ocelovou pletací jehlou a poté se zkumavky se udržují při 4-10 °C po dobu 20-24 hodin.
Usazené sérum se nalije do suchých sterilních zkumavek, uzavřou se a odešlou do laboratoře během prvního dne a ve výjimečných případech nejpozději třetí den po odběru krve.
Porušení podmínek uchovávání vzorků může způsobit chyby analýzy. V důsledku delšího stání séra nad červenými krvinkami může dojít k posunům v koncentraci řady složek: zvyšuje se koncentrace draslíku, aktivita kyselé fosfatázy, aminotransferáz, laktátdehydrogenázy, hydroxybutyrátdehydrogenázy a snižuje se obsah glukózy. v důsledku glykolytických procesů.
Při teplotě cca 20°C se zvyšuje obsah amoniaku v plné krvi, mnohé enzymy i při teplotách v ledničce rychle ztrácejí svou aktivitu (kreatinkináza, kyselá fosfatáza), laktátdehydrogenáza naopak rychleji ztrácí aktivitu při nízkých teplotách. teploty.
Hemolýza erytrocytů, ke které dochází při odběru nebo skladování, vede ke zvýšení koncentrace draslíku, aktivity kyselé fosfatázy, aminotransferáz, laktátdehydrogenázy a hydroxybutyrátdehydrogenázy.
Nevhodné protřepávání vzorků během míchání nebo přepravy může také způsobit hemolýzu červených krvinek.
Krevní sérum musí být dodáno do laboratoře během prvních 24 hodin a ve výjimečných případech nejpozději třetí den po odběru krve.
Při odesílání séra na velkou vzdálenost, zejména v létě, je nutné jej konzervovat 5% roztokem kyseliny karbolové ve fyziologickém roztoku v poměru 9 ml roztoku kyseliny karbolové nebo 1-1 kapky roztoku na 2 ml séra pro každých 1 ml séra.
Roztok kyseliny karbolové se musí přidávat po kapkách za stálého protřepávání zkumavky se sérem.
Sérum nebo krev lze také konzervovat kyselinou boritou (v prášku) v množství 0,05-0,07 g (na špičce skalpelu) na zkumavku krve (séra).
Na každém vzorku séra nebo krve je uvedeno jeho číslo nebo jméno zvířete nebo příjmení majitele zvířete.
Zkumavky s krví a sérem jsou těsně uzavřeny sterilními zátkami a umístěny pro přepravu v přísně svislé poloze.
V zimě jsou séra balena a expedována tak, aby nezmrzla.
Vzorky se zasílají s průvodními dokumenty ve dvou vyhotoveních
Odběr krve pro hematologické studie
Krev pro hematologická vyšetření se odebírá z jugulární nebo ocasní žíly do speciálních systémů pro odběr krve s antikoagulantem nebo do zkumavek s antikoagulancii. Trilon B (EDTA-disodná sůl kyseliny ethylendiamintetraoctové) se používá jako antikoagulanty v množství 0,1 ml 10% roztoku na 1 ml krve, heparinu (5 jednotek na 1 ml krve) nebo 6% roztoku citrátu sodného (0,1 1 ml na XNUMX ml).
Aby se zabránilo srážení krve, obsah zkumavky se okamžitě důkladně promíchá. Stabilizovaná krev se před testováním uchovává v chladničce při teplotě 2-4 0 C a vyšetřuje se nejpozději do 36 hodin od okamžiku odběru.
V dnešní době je věnována velká pozornost zlepšování složkového složení mléka. Jsou pro to minimálně dva důvody. Za prvé, lidská výživa vyžaduje produkt bohatý na živiny. Za druhé, výdělky farmáře závisí na množství tuku a bílkovin v mléce. Mléčné složky ovlivňuje řada faktorů: genetika, věk, období laktace, životní podmínky, klimatické podmínky a další. Během XIII. mezinárodního mlékárenského kongresu Marian Altemaer, produktový manažer společnosti BIOCHEM (Německo), hovořil o tom, jak moc je možné ovlivnit složení mléka krmením.
Výroba mléka a jeho složek
Pokud chceme ovlivnit složkové složení mléka, pak si nejprve musíme zapamatovat, z čeho se skládá a jak vzniká. Jeho hlavní část tvoří obyčejná voda (asi 87 %). Druhou největší složkou je mléčný cukr, neboli laktóza (4,7 %). Mléko také obsahuje tak důležité prvky, jako je tuk (4,2 %) a bílkoviny (3,4 %). Podstatně menší podíl je v ní další důležité složky – popel, tedy vitamíny a minerály (0,7 %).
Co si zapamatovat? Produkce mléka je pro krávy dřina. Předpokládejme, že kráva vyprodukuje 9000 kg mléka za 305 dní laktace, tedy téměř 30 kg mléka denně. Tělo zvířete obsahuje asi 50 litrů krve. Jen pro metabolismus potřebuje denně napumpovat 72 tisíc litrů krve. Víme také, že k produkci 1 litru mléka je třeba propumpovat vemenem 440 litrů krve a na 30 kg – 13 tisíc litrů, tedy 20 % navíc k metabolickému oběhu. Pokud produktivita krávy dosáhne 10–12 tisíc kg mléka za laktaci, je zatížení zvířete ještě větší. Proto je nesmírně důležité poskytnout kravám vše, co potřebují, včetně živin pro syntézu mléka.
Zvažme pečlivě jeho jednotlivé složky.
Tuk
Pokud jde o mléčný tuk, musíme pochopit, že existují dvě frakce:
- mastné kyseliny s dlouhým řetězcem – pohybují se od 50 do 70 %;
- mastné kyseliny s krátkým a středně dlouhým řetězcem – od 30 do 50 %.
Prekurzory mastných kyselin s dlouhým řetězcem v mléce jsou mastné kyseliny s dlouhým řetězcem ze složek potravy nebo zásob tělesného tuku, které jsou transportovány krevním řečištěm do vemene a slouží k produkci mléčného tuku. Mastné kyseliny s krátkým a středně dlouhým řetězcem jsou syntetizovány v mléčných žlázách s butyrátem a acetátem, které vznikají při trávení v bachoru.
Protein
Mléčná bílkovina se také dělí na dvě frakce:
- kasein;
- syrovátkový protein.
Největší podíl bílkovin v mléce tvoří kasein (α-, β a κ-kasein). Hraje důležitou roli při výrobě sýrů a dalších mléčných výrobků. Kasein je syntetizován ve vemeni z aminokyselin. Bylo spočítáno, že kráva potřebuje 1 kg aminokyselin (to je hodně!) na produkci 37 kg mléka.
Syrovátkový protein je částečně syntetizován ve vemeni. Pochází převážně z plazmy a jeho obsah závisí na fázi laktace. Část syrovátkové bílkoviny tvoří imunoglobuliny a jejich obsah je nejvyšší v prvních dnech laktace ve srovnání s jinými stádii.
Laktóza
Laktóza je tvořena kombinací glukózy a galaktózy. Hlavním prekurzorem laktózy je glukóza. Nesporným faktem je, že 70 až 90 % veškeré dostupné glukózy kráva využije k syntéze laktózy. A problém je v tom, že tato glukóza nemůže být nahrazena žádným jiným druhem cukru k výrobě laktózy a mléka.
Ovlivňující faktory
Konečně se dostáváme k hlavním otázkám: jak můžeme ovlivnit složení mléka a je možné ovlivnit všechny složky stejně?
Tuk je složka, jejíž obsah v mléce je nejvíce vystaven krmení. Pro výrobu mastných kyselin se středním a krátkým řetězcem jsou nezbytné acetát a butyrát. Pokud zvýšíte jejich syntézu v bachoru, můžete tedy zvýšit obsah tuku v mléce (tabulka 1).
Toho lze dosáhnout zvýšením koncentrace vlákniny ve stravě.
Pozor: Ne ledajaká, ale cenově dostupnější vláknina. Obsah tuku v mléce můžete zvýšit přidáním glycerinu do stravy a také mastných kyselin s dlouhým řetězcem, které jsou chráněny před rozkladem v bachoru a vstřebávají se přímo z krevního řečiště ve vemeni.
V období negativní energetické bilance (NEB) na začátku laktace je vyšší obsah tuku v mléce jen proto, že ho krávy mobilizují více z vlastních tukových zásob. Tento tuk se používá jako zdroj kyselin s dlouhým řetězcem v mléce. Na druhou stranu, pokud zvýšíte množství škrobu a cukru ve stravě, obsah mastných kyselin s dlouhým řetězcem v mléce se sníží. Totéž se stane, pokud zvýšíte koncentraci tuku stravitelného v bachoru. To znamená, že pokud se většina krmného tuku rozloží v bachoru, kráva ho nebude moci využít jako mastné kyseliny s dlouhým řetězcem do mléka.
Na obsah tuku v mléce má kromě krmení velký vliv genetika. Například plemeno Jersey přirozeně produkuje tučnější mléko ve srovnání s holštýnským. Problémem mohou být i klimatické nebo povětrnostní podmínky. Při tepelném stresu klesá obsah tuku v mléce. Takže nejlepší způsob, jak zvýšit obsah tuku v mléce, je zvýšit produkci acetátu a butyrátu v bachoru. Množství bílkovin v mléce je krmením ovlivněno jen částečně. Pro optimální produkci mléčných bílkovin musíte poskytnout dostatek energie a bílkovin, aby se vstřebaly v tenkém střevě. Přidání škrobu a tuku do stravy může mít pozitivní vliv na bílkoviny. Obsah bílkovin v mléce opět závisí na genetice a období laktace.
Laktóza – složka, kterou nelze příliš ovlivnit krmením. Samozřejmě, pokud kráva dostane potřebné množství glukózy a energie, pak bude glukogeneze lepší. Určujícími faktory pro laktózu jsou však genetika, laktace a zvláště důležité je zdraví děložního čípku. Na trhu je řada přípravků, které pomáhají zvýšit příjem krmiva a užitkovost a také zlepšit složení mléka – například pomalu se uvolňující zdroje dusíku pro mikrobiální produkci, aminokyseliny a tuky chráněné v bachoru, kvasnice a podobně. Zvláštní pozornost si zaslouží živé kvasnice.
ŽIVÉ KVASENÍ
Existuje vztah mezi acidózou bachoru a obsahem mléčného tuku. Důvod je jednoduchý: při bachorové acidóze je narušena optimální hladina pH pro celulolytické bakterie. Hlavním produktem celulolytických bakterií je acetát, který je potřebný pro syntézu tuku ve vemeni.
Jak mohou živé kvasinky pomoci?
Hlavním důvodem použití živých kvasinek je jejich metabolismus. Pokud do krmení dojnice přidáte živé kvasinky, stane se v bachoru následující:
1. Kvasinky využijí dostupnou glukózu, kterou obvykle využívají bachorové mikroby, jejímž konečným produktem je kyselina mléčná. Ten je známý tím, že snižuje pH bachoru natolik, že krávy onemocní. Krmením kvasinek tedy stabilizujeme pH bachoru (schéma 2).
2. Živé kvasinky absorbují kyslík, který celulolytické bakterie nemají rády, stejně jako nízké pH. Zvýšením aktivity anaerobních a celulolytických bakterií zvyšujeme stravitelnost vlákniny, čímž se v bachoru tvoří více octanu a lze jej využít pro syntézu tuku ve vemeni.
Živé kvasnice tedy pomáhají snižovat riziko acidózy, zlepšují stravitelnost vlákniny a konverzi krmiva. Pokud se krávě a jejímu bachoru daří dobře, znamená to lepší příjem krmiva a vyšší produktivitu.
Zde jsou výsledky studie o použití živých kvasnic na komerční mléčné farmě. Konalo se v lednu až dubnu 2015. Od 180. do 2. dne dojení bylo zapojeno 5 plnoletých krav (10−250 laktací).
Kontrolní a experimentální skupina konzumovaly stejnou stravu, typickou pro Německo (tabulka 2), zatímco krávy experimentální skupiny přidávaly 3 g živých kvasinek na hlavu a den (1 × 4,5 CFU na hlavu a den). Vzhledem k obsahu energie a škrobu byla strava pro dojnice a pro bachorové mikroby docela kritická. Během studie byla analyzována naděje (mléko upravené na obsah energie) a složení mléka, výsledky jsou uvedeny v grafu 1010 a tabulce. 1.
Jak je vidět, skupina krav, které dostávaly kvasnice, měla vyšší dojivost a nedocházelo k výraznému poklesu užitkovosti během laktace, jako tomu bylo u krav, které kvasnice nekonzumovaly. Zajímavé je, že krmení droždím neovlivnilo obsah bílkovin v mléce, a to není překvapivé, ale byl získán vyšší obsah tuku. To ukazuje na lepší trávení vlákniny, větší produkci acetátu a v důsledku toho více tuku v mléce (graf 2 a tabulka 4). Struktura hnoje byla také analyzována každý druhý týden. Celkové množství fekálních zbytků se mezi kontrolní a experimentální skupinou nelišilo (295,0 vs. 287,3 g), ale distribuce podílů mezi síty byla významně odlišná. Z grafu 3 je vidět, že krávy, které nepřijímaly živé kvasinky, měly na prvním sítu stejné ukazatele jako krávy v experimentální skupině, ale na střední části bylo více částic a na dně méně. Je pro nás důležité mít více částic ve spodním sítu, protože to znamená, že složky krmné dávky byly lépe stráveny. Díky živým kvasnicím se tedy zlepšuje stravitelnost krmiva a tím i konverze.
Tel/fax: +380 4420624 07
